Integración de células en tejidos

LAS CÉLULAS EN SU CONTEXTO SOCIAL : LAS CÉLULAS EN SU CONTEXTO SOCIAL BIOLOGIA ORAL DR. JUAN CARLOS MUNEVAR RESIDENTES II SEMESTRE ORTODONCIA NICOLAS ARBOLEDA INGRID QUINTERO DIANA REINA

TABLA DE CONTENIDO : TABLA DE CONTENIDO Adhesión entre células y entre célula y matriz Tejidos epiteliales laminares: Moléculas de unión y adhesión Matriz extracelular de las láminas epiteliales Matriz extracelular de los tejidos no epiteliales Interacciones adhesivas y células no epiteliales

UNIONES CELULARES : UNIONES CELULARES 1. Célula a Célula: Proteínas Integrales de membrana especializada (CAM) 2. Célula a Matriz: Receptores de adhesión de la membrana LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

UNIONES CELULARES : UNIONES CELULARES 1. Uniones de oclusión : uniones estrechas 2. Uniones de anclaje a. De anclaje de los filamentos de actina Célula-célula: banda de adhesión Célula-matríz: contacto focal b. De anclaje de filamentos intermedios Célula-célula: Desmosomas Célula-matríz: Hemidesmosomas 3. Uniones de comunicación: tipo Gap ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES DE OCLUSION : UNIONES DE OCLUSION UNIONES ESTRECHAS Debajo de la superficie apical Barrera selectiva Evitan difusión de macromoléculas, iones Estabilizan y mantienen polaridad de células epiteliales Principales proteínas de 3-4 nm integrales de membrana: 1. Ocludina 2. Claudina LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

UNIONES ESTRECHAS : UNIONES ESTRECHAS Requiere Ca2+ Proteínas con 4 hélices α JAM (junction adhesion molecules) contribuyen a adhesión homófila (superfamilia Ig) Tratamiento con proteasa tripsina destruye las uniones estrechas LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

UNIONES ESTRECHAS : UNIONES ESTRECHAS ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES ESTRECHAS : UNIONES ESTRECHAS Ca 2+ importante en la formación e integridad de éstas uniones Restringen movimientos de proteínas y lípidos de la membrana Barrera de difusión no absoluta LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

UNIONES DE ANCLAJE : UNIONES DE ANCLAJE Ampliamente distribuídas Unidades estructurales resistentes: músculo cardíaco y epidermis Formas estructurales: 1. Uniones adherentes (actina) 2. Desmosomas (filamentos intermedios) 3. Hemidesmosomas (filamentos intermedios) ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES DE ANCLAJE : UNIONES DE ANCLAJE Dos clases de proteínas 1. Proteínas de adhesión intracelular 2. Glucoproteínas transmembrana de unión ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES ADHERENTES : UNIONES ADHERENTES Conectan las fibras de actina Epitelios: Banda de adhesión (Zonula Adherens) debajo de las uniones estrechas mediadas por cadherinas Mecanismos dependientes del Ca2+ Actina unida a la banda a través de α, β y gama-catenina, vinculina , α actinina y placoglobina ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES ADHERENTES : UNIONES ADHERENTES Célula-matríz Contactos focales o placas de adhesión Zonas terminales de los haces de actina Glucoproteínas que median ésta adhesión: Integrinas Unión a los filamentos de actina a través de talina, α-actinina y vinculina ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES ADHERENTES : UNIONES ADHERENTES 1. Cadherinas 2. Superfamilia de las Ig Familias de CAM 3. Integrinas 4. Selectinas LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

CAM : CAM Dominios: especificidad de unión que caracteriza una proteína Dominios extracelulares adhesión homotípica y heterotípica Pueden estar distribuídas o agruparse en uniones celulares LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

CAM : CAM Dominios orientados hacia el citosol reclutan proteínas adaptadoras al citoesqueleto y vías de señalización LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

INTERACCIONES MOLECULARES : INTERACCIONES MOLECULARES CAM se asocian a través de Interacciones intracelulares o cis Interacciones intercelulares o trans Dominios extracelulares Dominios citosólicos LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

CADHERINAS : CADHERINAS Glicoproteínas transmembranales Dependiente del Ca 2+ Tipo I o clásicas: Cadherina –E (epitelial) Cadherina-P (placenta) Cadherina-N (neural) Cadherina-L (hepática) ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

CADHERINAS : CADHERINAS Tres regiones 1. Extracelular: Aminoterminal determina especificidad 2. Transmembranal 3. Intracelular: C-terminal (filamentos de actina) www.izt.uam.mx/contactos/n68ne/cadherina.pdf Cadherina-Cadherina: mecanismo de adhesión .Alfredo Trejo Cordova,Contactos 68, 30-33 . 2008

CADHERINAS : CADHERINAS Región extracelular: cinco dominios (EC1 o distal a EC5) Formados por 100 aa 10 aa participan en la unión entre dominios Sitios de unión al Ca 2+ Adhesión homofílica : cis y trans www.izt.uam.mx/contactos/n68ne/cadherina.pdf Cadherina-Cadherina: mecanismo de adhesión .Alfredo Trejo Cordova,Contactos 68, 30-33 . 2008

CADHERINAS : CADHERINAS Interacción lateral: dímeros laterales o cis Interacción hidrofóbica entre triptofano-2 (segundo aa) Independiente de Ca 2+ www.izt.uam.mx/contactos/n68ne/cadherina.pdf Cadherina-Cadherina: mecanismo de adhesión .Alfredo Trejo Cordova,Contactos 68, 30-33 . 2008

CADHERINAS : CADHERINAS Dímeros de adhesión trans en células opuestas Modelo dependiente de EC1: intercambio de 6 residuos de aa altamente conservados Cadherina-Cadherina: mecanismo de adhesión .Alfredo Trejo Cordova,Contactos 68, 30-33 . 2008 www.izt.uam.mx/contactos/n68ne/cadherina.pdf

CADHERINAS : CADHERINAS Dominios citosólicos C- terminales conectados al citoesqueleto por proteínas adaptadoras Cateninas α β y p120 Catenina β media adhesiones citoesqueléticas y puede translocarse al núcleo LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

CADHERINAS : CADHERINAS http://www2.uah.es/javier_lucio/Isabel/Presentaciones/adhesioncelular.pdf

SUPERFAMILIA DE LAS Ig : SUPERFAMILIA DE LAS Ig Adhesión de leucocitos a células endoteliales y migración Glucoproteínas con número variable de dominios extracelulares: 70-100 aa Formadas por 2 hojas β PECAM -1 o CD31: 6 dominios extracelulares tipo Ig 40% carbohidratos Leucocitos, plaquetas y células endoteliales – unión homofílica Formación de tapón plaquetario http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192.

SUPERFAMILA DE Ig : SUPERFAMILA DE Ig ICAMs: Glucoproteína Interacción leucocito-endotelio 2 (ICAM-2/CD102) o 5 (ICAM-1/CD54) dominios tipo Ig Dominios extracelulares interacción con LFA-1 (mayor afinidad ICAM-1) Porción intracelular: residuos serina, treonina y tirosina Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192. http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm

SUPERFAMILIA DE Ig : SUPERFAMILIA DE Ig VCAM-1 o CD106 en células endoteliales, macrófagos y células dendríticas. Marginación y pavimentación leucocitaria 6,7 y 8 dominios tipo Ig Asociada a la membrana por unión tipo GPI Interacciona con Integrina alfa 4/ beta 1 Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192.

Slide 27 : Superfamilia de las Inmunoglobulinas www.monografias.com/trabajos904/moleculas-adh...

INTEGRINAS : INTEGRINAS Median interacción célula-célula y célula ECM Proteínas integrales de membrana heterodiméricas Dos subunidades polipeptídicas transmembranales: α y β Clasificación según cadena β (21 tipos) Cadenas α son glicoproteínas de PM 120-180kD Cadena β de PM 90-110 kD Asociación no covalente http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm Sánchez-Mateos P, Cabañas C y Sánchez-Madrid P. (1996). Regulation of integrin function. Sem. Cancer Biol., 7:99-109.

INTEGRINA : INTEGRINA Extremo N-terminal 7 u 8 regiones homólogas 3 o 4 unen cationes divalentes (Ca 2+, Mg 2+, Mn 2+) Cadena β: regiones conservadoras ricas en cisteína forman puentes disulfuro intracatenarios Combinación con ligando: dos cadenas Especificidad mediada por cadena α http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm Sánchez-Mateos P, Cabañas C y Sánchez-Madrid P. (1996). Regulation of integrin function. Sem. Cancer Biol., 7:99-109.

INTEGRINAS : INTEGRINAS Dominio citoplasmático pequeño Interacciona con proteínas adaptadoras Se agrupan en los complejos de adhesión focal asociándose a talina y actina α vinculina, tensina y actina http://portales.educared.net/wikiEducared/index.php?title=La_membrana_plasm%C3%A1tica

INTEGRINA : INTEGRINA Complejo de adhesión focal Se asocian FAK ( quinasa de adhesión focal) , Proteín tirosin quinasas (Src,Csk), PKC (serina-treonina), cinasas de fosfolípidos reorganización citoesqueleto e inducción genes Activa Fosfolipasa C y MAP cinasas http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm Sánchez-Mateos P, Cabañas C y Sánchez-Madrid P. (1996). Regulation of integrin function. Sem. Cancer Biol., 7:99-109.

INTEGRINAS : INTEGRINAS Subfamilias: según su cadena β: beta-1, beta-2, beta-7 Beta-1: CD29 y cadena alfa de diferentes tipos VLA (very late activation) con 6 tipos de cadena α (CD 49 a-f) VLA1-VLA6 Se expresan en todas las células menos en granulocitos Eosinófilos – VLA4 Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192.

INTEGRINAS : INTEGRINAS Beta 2: CD18 son integrinas linfoides con 3 isoformas (CD 11) de cadena α y cadena β2 común “Integrina leucocitaria”. Adhesión a células endoteliales 1.LFA-1 (Lymphocyte function-associated Antígen-1) 1 cadena β2 y una α1 (linfocitos, NK, monocitos, macrófagos y granulocitos) Ligandos: ICAM-1, 2 y 3 2. MAC-1 o CD11b-CD18 (células de Langherhans) Ligandos: ICAM-1, fibronectina, factor X 3. p150,95 o CD11c-CD18 Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192.

INTEGRINAS : INTEGRINAS Beta-7: linfocitos en placas de Peyer Se unen en la ECM a la fibronectina, laminina, a ICAM-1, fibrinógeno y factor de Von Willebrand Interacción con Laminina por regiones MIDAS (Metal Ion-Dependent Adhesion Site) dos cadenas α y átomo de Ca Interactúan principalmente con actina y menos con filamentos intermedios Villarroel M .Acta odontol. venez., dic. 1999, vol. 37, nº.3, p.188-192.

Slide 35 : www.monografias.com/trabajos904/moleculas-adh...

SELECTINA : SELECTINA Tres glucoproteínas Dominio N-terminal tipo lectina C Dominio tipo factor de crecimiento epidérmico Dominio tipo proteína reguladora del complemento Porción transmembrana Dominio intracitoplasmático corto http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/figuras_inmuno/figc08/paginas/Diapositiva4.htm Rosen SD y Bertozzi CR (1994). The selectins and their ligands. Curr. Opinion Cell Biol., 6:663-673

SELECTINA : SELECTINA Tres miembros que corresponden a los antígenos de diferenciación leucocitaria que se unen a oligosacáridos – proteínas transmembranales 1- CD62L (Lselectina) 2- CD62P (P-selectina) 3- CD62E (E-selectina) Luego de activación celular son removidas por internalización a lisosomas (P-E selectinas) o por corte proteolítico (L-E selectinas) Rosen SD y Bertozzi CR (1994). The selectins and their ligands. Curr. Opinion Cell Biol., 6:663-673

SELECTINA : SELECTINA Moléculas que interaccionan con selectinas: GlyCAM-1 (Glycosylated-dependent CAM-1) – células endoteliales de vénulas en ganglios CD-34 – antígeno de diferenciación leucocitaria MadCAM-1 (Mucosal addressin CAM-1) – superfamilia de las Ig (Endotelio de vasos sanguíneos) PSGL-1 (P Selectin Glycoprotein Ligand-1) Mucinas, ricamente glicosiladas en residuos de serina y treonina Rosen SD y Bertozzi CR (1994). The selectins and their ligands. Curr. Opinion Cell Biol., 6:663-673

UNIONES DE ANCLAJE : UNIONES DE ANCLAJE DESMOSOMAS Lugar de anclaje para filamentos intermedios (rigidez) Filamentos de queratina (células epiteliales) y de desmina (fibras musculares cardíacas) ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES DE ANCLAJE : UNIONES DE ANCLAJE Placa citoplasmática: complejo proteico de anclaje intracelular (placoglobinas y desmoplaquinas) Asociada a red de filamentos de queratina Proteínas de unión transmembranal: cadherinas ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

CADHERINA DESMOSOMICA : CADHERINA DESMOSOMICA Contiene dos proteínas cadherina especializadas: Desmogleína Desmocolina Dominio citosólico interactúa Placoglobina Desmoplaquina LODISH. Harvey. Biología celular y molecular. Editorial médica Panamericana. Quinta Edición, 2005

UNIONES DE ANCLAJE : UNIONES DE ANCLAJE HEMIDESMOSOMAS Unen el dominio basal de las células y la lámina basal Filamentos se anclan en sus regiones terminales Proteínas de unión: Integrinas ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES DE COMUNICACION : UNIONES DE COMUNICACION GAP JUNCTION Amplia distribución Membranas celulares separadas por un espacio de 2-4nm Paso de iones y moléculas hidrosolubles con PM no mayor a 1000 daltons ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES DE COMUNICACION : UNIONES DE COMUNICACION Alternan estados abiertos y cerrados Permeabilidad disminuída por descenso de pH o aumento de Ca 2+ libre citoplasmático ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

UNIONES CELULARES : UNIONES CELULARES uniones estrechas: actúan como barrera restringiendo el movimiento de moléculas entre el dominio apical y basolateral uniones adherentes: unen a las células entre si a través de un citoesqueleto contráctil. Juegan un rol importante en la morfogénesis desmosomas: unen a las células entre sí a través de un citoesqueleto rígido. Contribuyen a mantener la estructura del epitelio hemidesmosomas: unen a las células a la membrana basal. Cumplen un rol estructural adhesiones focales: cumplen un rol mecánico y de señalización; unen las células a la membrana basal uniones en hendidura: permiten el pasaje de iones, segundos mensajeros, y otras moléculas ALBERTS. Bruce. Biología molecular de la célula. Editorial Omega. Tercera Edición, 2002

Slide 46 : MATRIZ extracelular de las laminas epiteliales

Slide 47 : MATRIZ EXTRACELULAR Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005. Envuelve y organiza muchas células en los tejidos Constituida por proteínas secretadas y polisacáridos Coordina las funciones celulares Rellena el espacio entre las células y une entre si la células a los tejidos

Slide 48 : INTERACCION CELULA-MATRIZ EXTRACELULAR INTEGRINA Sirve como medio de anclaje al CITOESQUELETO Unión célula - Matriz extracelular Estabilidad de las uniones CELULA-MATRIZ Unión del citoesqueleto -Matriz Extracelular Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 49 : MOLECULAS DE LA MATRIZ EXTRACELULAR Proteoglucanos Fibras de Colágeno Proteínas multiadhesivas Altamente Viscoso Un grupo de glucoproteínas amortigua el contacto (célula-molécula extracelulares) Fuerza mecánica Elasticidad Solubles Fija e interconecta los receptores de adehesión (superficie celular y otros componentes de la ME Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 50 : LAMINA BASAL Regenera tejidos Organiza las células en los tejidos Guía las células en migración durante la formación de tejidos Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 51 :

Slide 52 : COMPONENTES PROTEÍCOS DE LA LÁMINA BASAL Colágeno tipo IV Lamininas Entactina Perlecano Lodihs, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 53 : 20 tipos de colageno Forma hélices triples, las cadenas polipetidicas se enrollan una alrededor de la otra en una estructura en forma de cuerda Se diferencian por: # y la longitud de los segmentos helicoidales triples Su estructura tridimensional Modificación covalente de las cadenas α COLAGENO Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 54 : Colágeno tipo IV Función principal es la de sostén y filtración Colágeno que forma la lámina basal Polipeptido (3 a.a Gly-X-Y) No se polimeriza en fibrillas, sino que forma un enmallado de moléculas orientadas al azar, asociadas a proteoglicanos y con las proteínas estructurales laminina y fibronectina. Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 55 : Glicoproteina Moléculas largas y flexibles (heterotrímeros) Responsables de la unión a colágeno y otras proteínas. Unión a la superficie celular mediada por integrinas Se encuentra a nivel de la lamina basal Lamininas Dominios LG median la unión dependiente Del Ca +2 a carbohidratos (sindecano) Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 56 : GLICOPROTEINA Moléculas compuestas por una proteína unida a uno o varios hidratos de carbono Reconocimiento celular Integrada por uno o más oligosacáridos Polímeros formados a base de monosacáridos unidos por enlaces O-glicosídicos. Molecular Biology of the Cell (3rd Edition). Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Garland Publishing

Slide 57 : Unión N-glicosídica a una proteína Unión O-glicosídica a una proteína www.ehu.es/biomoleculas GLICOPROTEINA Molecular Biology of the Cell (3rd Edition). Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Garland Publishing

Slide 58 : Glicoproteina pequeña Se asocia a la laminina y colageno IV Da estabilidad a la estructura Entactina Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 59 : Proteoglucanos Subgrupo de glucoproteínas con cadenas de polisacaridos (glucosaminoglucanos –GAG) Largos polímeros lineales de disacáridos específicos repetidos Se sintetizan en el retículo endoplasmático Molecular Biology of the Cell (3rd Edition). Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Garland Publishing Mantienen hidratada la matriz extracelular

Slide 60 : Proteoglucanos Sindecanos Interacciones entre célula y matriz Presentar ciertas moléculas de señalización externa a sus receptores de la superficie celular Expresados por células epiteliales Proteínas con dominio de transmembrana (correceptores) Molecular Biology of the Cell (3rd Edition). Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Garland Publishing

Slide 61 : Clasificación Proteoglicanos Proteina GAGs Condroitin Sulfato Dermatan Sulfato Queratan Sulfato Heparan Sulfato Condroitina 4– y 6–sulfatos: Compuesto de D-glucoronatoy GalNAc-4- o 6-sulfatounión tipo β(1, 3) Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 62 : Dermatan sulfatos: Compuestos de L-iduronato (muchos contienen sulfato)+ GalNAc-4-sulfatounión tipo α(1, 3) Heparina y Heparan Sulfatos: Compuesto de iduronato-2-sulfato (D-glucuronato-2-sulfato)y N-sulfo-D-glucosamina-6-sulfatounión tipo α(1, 4)(heparan tienen menos sulfato que las heparinas) Queratan sulfatos: Compuestos de galactosa + GlcNAc-6-sulfatounión tipo β(1, 4)

Slide 63 : GLICOSAMINOGLICANO GAGS N- acetil glucosamina N- acetil galactoamina

Slide 64 : GLICOSAMINOGLICANO GAGS Constituido por unidades repetidas de disacárido. Proporcionan un soporte mecánico a la matriz extracelular Se une a proteínas para formar PROTEOGLICANOS Gel formado por polisacárido Lodish, Harvey; Et al. Biología celular y molecular, 5ª edición PANAMERICANA 2005.

Slide 65 : Aminoácido

Slide 66 : Monosacárido

Slide 67 : ALTERACIONES

Slide 68 : Síndrome de Ehlers-Danlos http://images.google.com.co/imgres

Matriz extracelular de los tejidos no epiteliales : Matriz extracelular de los tejidos no epiteliales

Colágeno I : Colágeno I Hélice triple larga : 2 cadenas alfa1 y una cadena alfa 2. Fibrillas Fibras de colágeno

Síntesis de colágeno : Síntesis de colágeno 1:formacion de las cadenas de procolágeno. 2: Asociación, unidos por enlaces covalentes disulfuros. Modificaciones: hidroxilacion o isomerizacion (prolinas y lisinas)

Síntesis de colágeno : Síntesis de colágeno 3: Unión a la chaperona Hsp47 estabiliza las hélices y evita la agregación de trímeros. 4 y 5: Trasporte al aparato de Golgi generando asociaciones laterales. 6:Secrecion 7: Peptidasa extra celular (proteina 1 morfogenetica osea)

Slide 73 :

Diferencia entre Alfa 1 y Alfa 2 : Diferencia entre Alfa 1 y Alfa 2

Asociación de distintos tipos de colágeno : Asociación de distintos tipos de colágeno Tendones: Proteoglicanos y Colágeno VI (en forma no covalente) generando fibras mas gruesas. Cartílago: Colágeno IX se une en intervalos regulares (enlace covalente)

Fibronectina : Fibronectina

Fibronectina : Fibronectina

Unión de Fibronectina - Integrinas : Unión de Fibronectina - Integrinas RGD: Arg-Gly-Asp

La adhesión entre célula y matriz es modulada por variación en la actividad de unión y por la cantidad de integrinas : La adhesión entre célula y matriz es modulada por variación en la actividad de unión y por la cantidad de integrinas Baja afinidad (inactiva) alta afinidad (activa). Los cambios de conformación incrementan la afinidad por los ligandos. Separación de dominios alteran el citoesqueleto y activan o inhiben las vías de señalización.

El movimiento de los leucocitos hacia el interior de los tejidos (extravasación) depende de interacciones adhesivas : El movimiento de los leucocitos hacia el interior de los tejidos (extravasación) depende de interacciones adhesivas Mediados por selectinas: interacciones entre células vasculares y leucocitos

Uniones Intercitoplasmaticas (Gap junctions) : Uniones Intercitoplasmaticas (Gap junctions) Hemicanales están compuestos por las Conexinas. Iones y moléculas pequeñas pueden pasar a través de las uniones permitiendo el acople metabólico y eléctrico entre células.

MECHANICAL LOADING STIMULATES EXPRESSION OF CONNEXIN 43 IN ALVEOLAR BONE CELLS IN THE TOOTH MOVEMENT MODEL : MECHANICAL LOADING STIMULATES EXPRESSION OF CONNEXIN 43 IN ALVEOLAR BONE CELLS IN THE TOOTH MOVEMENT MODEL JELICA GLUHAK (1)- HEINRICH, SUMIN GU (2) et al. Cell commun. Adhes. 2006; 13 (1-2): 115-125 Deparment of Orthodontics, University of Texas Health Science Center, San Antonio Texas, USA Deparment of Biochemestry, University of Texas Health Science Center, San Antonio Texas, USA

Materiales y Métodos : Materiales y Métodos CARGA MECÁNICA DEL HUESO ALVEOLAR Incisivos y primer molar superior 10-12 g 6-7 días Preparaciones para las secciones histológicas Hibridización In Situ y cuantificación Cuantificación de la señal de hibridización y análisis de imagen INMUNOCITOQUIMICA DE Cx43 Y 45

Slide 84 : RESULTADOS

Slide 85 : Expresión de TRAP: + en células cercanas a la superficie ósea en sitios de compresión luego de 4 días de tratamiento. TRAP - células de la superficie del hueso en lado de tensión. Compresión(reabsorción): Formación osteoclastos Tensión (formación): Osteblastos

Slide 86 : No hubo diferencia en la expresión de mRNA Cx43 entre los animales no tratados y controles (maxilar izq) de los animales tratados EXPRESION DE mRNA Cx43 EN EL PERIODONTO BAJO CARGAS MECÁNICAS

Slide 87 : EXPRESION DE mRNA Cx43 EN EL PERIODONTO BAJO CARGAS MECÁNICAS Una señal de hibridación uniforme estaba presente en todo el periodonto en los sitios de control. Aumento de la señal de hibridación se presento en osteoblastos y en células cercanas a la superficie del hueso a los 2 y 4 días.(formación). Aumento de la señal de hibridación se presento en osteoclastos multinucleados cerca de la superficie del hueso a los 4 días .(reabsorción)

Slide 88 : a. Aumento de mRNA Cx43 en un 73% luego de 2 días de tratamiento. 156% luego de 3 días 96% luego de 4 días 104% luego de 7 días b. Aumento de mRNA Cx43 en un 27% luego de 4 días 32% luego d e7 días. Efecto estimulatorio de Cx43 mRNA por la carga mecánica

Slide 89 : INMUNOCITOQUIMICA Luego de 6 horas de carga no hubo cambios significativos de niveles de Cx43 en sitios de formación y reabsorción ósea. Hubo aumento Cx43 a nivel de fibroblastos en los sitios de ´formación y reabsorción pero menor que en osteoblastos. La Cx43 fue significativamente alta en osteoblastos alveolares 4 días después de tratamiento en sitios de formación ósea.

RESULTADOS : RESULTADOS INMUNOCITOQUIMICA No hubo expresión de Cx45 en osteocitos, osteoblastos y fibroblastos luego de aplicada la carga. Solo se encontró aumentada en, médula y en tubo neural de embriones de 12 días. vasos sanguíneos y medula ósea a los 4 días de tratamiento Cx45

Slide 91 : DISCUSION

Slide 92 : Cx43 está ampliamente expresado en osteocitos (Mason, 1996, Cheng, 2001) La actividad de las uniones GAP y la acumulación de la proteína Cx43 en osteocitos está regulada por cargas mecánicas (Cheng 2001, Alford, 2003) En el presente estudio se encuentra que los niveles de Cx43 en respuesta a la carga muestran una regulación dinámica que no se correlaciona con la expresión de mRNA (Hibridización In Situ). Inmunocitoquimica mostró un gran aumento de Cx43 La estimulación de la proteína Cx43 con carga parece no estar regulada por los niveles de mRNA ya que la no hay alteración de la expresión del mRNA Cx43 luego de la carga